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背景简介
根据科技部、财政部[2000]507号文件和国家质检总局99号文件,动植物检疫实验所于2001年5月正式设立了"国家质检总局转基因产品检测技术中心"与"国家转基因植物产品检测实验室"。主要任务为:进出境转基因产品的安全评估和检测技术的研究,国内外转基因产品、法律法规信息的收集,检测标准试剂的生产、供应及技术培训等。
基本设施
实验室设施主要包括:20㎡的样品制备室、15㎡的配液室、20㎡的PCR室、25㎡的分析室、15㎡的低温冷库和15㎡的组织培养室,总面积超过100㎡,各实验环节做到严格分区以防止污染。
仪器设备
ABI7700荧光定量PCR仪,定量PCR配套离心机、ALPHA5500型凝胶扫描仪、BECKMAN紫外分光光度计、杂交箱、PCR防污染台、BECKMAN台式冷冻离心机和高速离心机等。
国家质检总局领导一直关心转基因项目的进展情况并在财政上给予大力支持,2001年拨款398万元作为配套资金,用于"国家转基因产品检测实验室"仪器配置及建设,拟购置的仪器设备包括基因芯片点样仪、扫描仪、数据库服务器及相关软件、PNA/DNA合成仪和BIORAD纯化设备等。
研究内容
主要研究内容包括转基因作物及其产品的核酸提取方法、蛋白检测方法、实时荧光PCR和基因芯片检测方法的研究。此外,我中心正在开展品种特异性研究,为今后作物品种鉴定做技术储备。研究目标主要包括:建立转基因生物信息数据库、建立转基因产品定性筛选和定量检测方法、建立转基因产品基因芯片检测方法,及时将国外转基因产品检测新技术推广应用。
研究进展
转基因作物检测方面业已取得如下进展:
- 获得了田间试验和商品化转基因作物的主要信息;
- 建立了试纸条法、PCR/酶切分析法和PCR-ELISA法等转基因作物检测方法;
- 选择了7个基因作筛选目标,设计了多条特异性引物和荧光探针,筛选出最佳组合并优化了检测条件和参数,以此为基础研制成定性筛选试剂盒;选择玉米zein和大豆lectin作内标基因,用CaMV
35S启动子和玉米的CryIAb基因作目标基因,利用购自Fluka的标准品进行定量参数优化和制定操作步骤,检测灵敏度达到0.1%,定量检测标准差控制在可接受的范围内,并研发了转基因作物实时荧光PCR定量检测试剂盒。该部分内容已经通过科技部和国家质检总局组织的专家鉴定。相对检测灵敏度达到0.1%,绝对灵敏度为目标10个分子左右。
- 基因芯片检测方法取得一定进展。
国内外交流与技术培训
- 2001年5月参加并通过了美国谷物化学家协会组织的水平测试
- 2001年5月组织编译了《国外转基因产品管理法规汇编》和《国外转基因产品检测技术汇编》,方便了系统内外单位对转基因产品管理法规和检测技术的了解。
- 2001年6月份举办了质检系统"转基因产品检测技术培训班",7月份承担国家质检总局组织的"转基因产品定性检测水平测试"。
- 2002年5月组团赴欧盟进行转基因产品检测技术考察。
检测技术和方法
检测方法主要采用国际上转基因产品检测通用的实时荧光PCR法。
检测的转基因作物主要包括大豆、玉米、棉花、番茄、青椒、小白豆、烟草、马铃薯和油菜等;检测的转基因作物产品和食品主要有豆粕、淀粉、大豆粉、玉米粉、大豆卵磷脂、大豆蛋白和食品添加剂等。
我所转基因检测中心已为几十家企业出具非转基因产品检测说明书,检测结果得到了国外同行的认可,促进了我国农产品和加工食品向日本、韩国和欧盟等国的出口。
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